För att provet ska lyckas är det viktigt att du äter och dricker normalt dagen före provet och fram till att fastan börjar. Fastan, det vill säga att man inte äter, börjar10–14 timmar före glukosbelastningsprovet och fortsätter till slutet av provet. Under hela fastan måste du vara helt utan näring. Under fastan är det tillåtet att dricka vatten, men läsk, godis, pastiller, tuggummi, kaffe, te och alla alkoholhaltiga drycker är förbjudna. Rökning är också förbjuden. Fysisk ansträngning som orsakar svettning bör undvikas dagen före provet. Före provet kan du ta de nödvändiga läkemedlen på morgonen.
Undersökningen börjar kl. 7–9 på morgonen. Först tas ett blodprov (0-prov) och därefter dricker man under fem minuter 300 milliliter vatten som innehåller 75 gram glukos. Sedan väntar man och nya blodprov tas om 1 och 2 timmar (1h- och 2h-proven). Man ska alltså reservera tillräckligt med tid för testet.
Avvikande gränsvärden från glukosbelastningsprovet under graviditeten är fastevärde 5,3 mmol/l, värde efter en timme 10,0 mmol/l och efter två timmar 8,6 mmol/l. Om ett enda av de tre värdena är lika stort eller större än gränsvärdet har man graviditetsdiabetes.
Alla läkemedel som man tar ska antecknas. Bland annat betablockerare, glukokortikoider och antidepressiva läkemedel kan påverka provresultatet. Också eventuella infektioner och akut stress ska antecknas. Man ska sitta stilla under provet och man får inte röka. Vatten kan man dricka enligt behov.